Cas9-gRNA 靶点效率检测试剂盒
原理：
CRISPR/Cas9 是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御，可特异剪切外源的病毒及 DNA 以对抗入侵。人工改造过的 Cas9/gRNA 系统通过 gRNA(short guide RNA)引导 Cas9 蛋白识别并剪切带有 gRNA 靶点的双链 DNA, 用于基因敲除和精确
编辑 DNA 等操作。利用 CRISPR 技术进行基因敲除和编辑操作实验前，获得剪切活性高的 gRNA 靶点是实验成功的关键。Cas9/gRNA 剪切活性与 gRNA 靶点的识别序列有关，每个 gRNA 的剪切活性都会不同。
本方法通过 spCas9/gRNA 体外酶切靶点 DNA 片段，进行 gRNA 靶点活性的评估。体外 spCas9 酶切 DNA 效果与 DNA 浓度、spCas9 酶量、反应时间、gRNA 的量、靶点活性有关，为了科学地评价 gRNA 靶点效率，将固定 DNA 浓度和 spCas9 酶量，在一定
单位时间内，测量 spCas9 酶切靶点 DNA 的效率，并通过与已知有活性的 gRNA 靶点进行比较，评价目标 gRNA 靶点的活性。
产品组成：
| 组成 | 货号 | VK007-10T | VK0107-30T |
Csa9 酶切试剂 | Cas9(1U/μL) | VK007-10 | 12μL | 34μL |
10×saCas9 buffer | VK007-11 | 50μL | 200μL |
外体转录试剂 | T7RNA Polymerase Mix(5U/μL) | VK007-12 | 22μL | 62μL |
rNTP(100mM,rATP/rUTP/rCTP/rGTP) | VK007-13 | 24μL | 64μL |
10×Transcription Buffer | VK007-14 | 24μL | 64μL |
Stop Solution | VK007-15 | 200μL | 500μL |
DNasel(1U/μL) | VK007-16 | 24μL | 64μL |
标准 gRNA | 标准 gRNA 模板(50ng/μL) | VK007-17 | 20μL | 60μL |
标准 gRNA1(g1) 引物 g1-FP(10μM) | VK007-18 | 10μL | 30μL |
标准 gRNA2(g2) 引物 g2-FP(10μM) | VK007-19 | 10μL | 30μL |
反向引物 gRNA-RP(10μM) | VK007-20 | 30μL | 100μL |
DEPC H2O | VK007-21 | 1mL | 1mL |
注意：收到试剂盒后，使用前请离心，避免试剂滞留在离心管盖上。
保存条件：请将产品于 -20℃ 保存，避免反复冻融。
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