TNBS 诱导结肠炎动物模型
TNBS多与乙醇合用进行造模。该模型的机制是乙醇破坏肠黏膜屏障，TNBS作为一种有机酸半抗原渗入结肠组织，与组织蛋白等高分子物质结合，形成全抗原，使T淋巴细胞致敏，溶解了与半抗原结合的动物自身细胞，引起肠壁一系列免疫应答和炎症反应，随着组织的逐渐修复，可
出现一系列肠壁的增生性改变。
建模方法：
动物造模当日计为实验第1天，各组动物造模前禁食不禁水24 h，乙醚吸入麻醉，将一直径2.0 mm、长约12 cm的塑胶管由肛门轻缓插入大鼠体内
深约8 cm，缓慢注入一定浓度的TNBS的乙醇溶液，1 min之内完成。灌药完毕后，缓慢拔出塑胶管，用手捏住肛门，提起大鼠尾部，持续倒置3min，避免造模试剂流出，使造模剂充分渗入大鼠肠腔内。对照组动物使用等体积的生理盐水，按上述同样操作进行灌肠。各组动物均正常饲
养。
TNBS的乙醇溶液（将体积分数为5%的TNBS水溶液与无水乙醇以体积2:1混合）现配现用。
模型评价
1. 一般情况观察及体重记录
一般观察：观察各组动物的情况，若出现意外症状，记录情况并及时反馈；记录可能出现的死亡率。体重：从给药前一天开始，每三天称量
并记录各组动物体重，直至给药结束，绘制体重变化曲线。实验过程中体重共记录10次体重统计、变化曲线作图。
2. 肠组织取材及大体评分：
各组动物安乐死后，解剖时截取自肛门向上的整段结肠组织
测量结肠长度
3.进行宏观评价：
各个结肠组织带标尺拍照，记录原始的大体形态，依照评分标准进行评分。
4.结肠组织病理染色：
组织做以下处理：
每个结肠均分成3段，每个动物取材的位置要尽量一致（不管剪切位置是否有病理损伤尽量保持一致）。分别取3段组织中的前1厘米组织，
放入同1个EP管中，快速冷冻保存，备用（可用于分子检测）。
余下3段组织片段，用10%的中性福尔马林固定48小时，卷成“瑞士卷”， 用石蜡进行包埋，切片，以便可以看到整个结肠周围。后续进行HE染色进行组织病理学观察。对每个样本进行病理学评分，并统计汇总。
5.标志因子水平
第27天（最后一次给药完成后24h），取各组动物血清，均分为两份，冻存-80℃。
取其中一份血清样本，ELISA检测血清中IL-10、TNF-α含量。
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