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saCas9-gRNA 靶点效率检测试剂盒


原理:  

       CRISPR/Cas9CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御,可特异剪切外源的病毒及DNA以对抗入侵。人工改造过的Cas9/gRNA系统通过gRNA(short guide RNA)引导Cas9蛋白识别并剪切带有gRNA靶点的双链DNA,用于基因敲除和精确编辑DNA等操作。利用CRISPR 技术进行基因敲除和编辑操作实验前,获得剪切活性高的gRNA靶点是实验成功的关键。Cas9/gRNA 剪切活性与gRNA靶点的识别序列有关,每个gRNA的剪切活性都会不同。

        本试剂盒通过saCas9/gRNA体外酶切靶点DNA 片段,进行gRNA靶点活性的评估。体外saCas9酶切DNA效果与DNA浓度、saCas9酶量、反应时间、gRNA的量、靶点活性有关,为了科学地评价gRNA 靶点效率,将固定 DNA浓度和saCas9酶量,在一定单位时间内,测量saCas9酶切靶点DNA的效率,并通过与已知有活性的gRNA靶点进行比较,评价目标gRNA靶点的活性。


产品组成  


组成货号编号VK012-10TVK012-30T
saCsa9酶切试剂saCas9(1U/μL)
VK012-101#12μL34μL
10×saCas9 bufferVK012-112#50μL200μL
外体转录试剂T9 RNA Polymerase Mix(5U/μL)VK010-013#22μL62μL
rNTP(100mM,rATP/rUTP/rCTP/rGTP)VK010-024#24μL64μL
10×Transcription BufferVK010-035#24μL64μL
Stop SolutionVK010-046#200μL500μL
DNasel(1U/μL)VK010-057#24μL64μL
标准gRNA

标准gRNA模板(50ng/μLVK012-128#20μL60μL
标准gRNA1(g1)引物g1-FP(10μM)VK012-139#10μL30μL
标准gRNA2(g2)引物g2-FP(10μM)VK012-1410#10μL30μL
反向引物gRNA-RP(10μM)VK012-1511#30μL100μL
DEPC H2OVK010-0612#1mL1mL


注意: 收到试剂盒后,使用前请离心,避免试剂滞留在离心管盖上。


保存条件: 请将产品于-20℃保存,避免反复冻融  


请详见使用手册 


VK012-saCas9-gRNA靶点效率检测试剂盒